刘琳是土生土长的北京人。她从小就喜欢表演,上过电视节目,参加过朗诵比赛,但就是不知道应该通过什么途径成为演员。
初中毕业后,考入了中国儿童艺术剧院的培训机构,学习声乐、台词和表演。
高三时,她出演了人生的第一部电影《高楼边》,和她搭戏的是朱旭、吕中和姜武。
1993年,高中毕业后考入了北京电影学院表演系。在校期间她主演了几十集电视剧和数部电影故事片。
1993年,刘琳在电影《高楼边》中塑造了自己的第一个银幕形象女高中生宗小玫。
1994年,与张国荣、吴倩莲、黄磊共同主演剧情电影《夜半歌声》,在片中饰演蓝蝶。
1999年,联合巍子主演家庭伦理剧《没有家园的灵魂》饰演男主角张少杰的情人严文清。
2000年,刘琳凭借在张元执导的电影《过年回家》中的出色表现,获得第13届新加坡国际电影节最佳女主角奖。之后与齐志、汤加丽主演电视电影《刑警故事》饰舒菲。同年出演的电视剧《给我一支烟3今夜无眠》播出。
2001年,领衔主演何群执导的战争电影《平原枪声》,在剧中饰演爱国女青年苏建梅;同年,与何家劲,杨童舒共同主演时装剧《城市女人心》,在剧中饰演脾气火爆的向茹。
2003年,与施京明、姚芊羽主演农村题材剧《脚下天堂》;同年,与朱时茂、郭柯宇共同主演爱情剧《追梦谷》,在剧中饰演精明漂亮的销售主管孙卉。
2004年,与梅婷共同主演校园爱情剧《香樟树》,在剧中饰演芳芳、司马小衫的闺蜜陶妮。
2005年,领衔主演数字电影《遭遇·阮玲玉》。同年在传记题材剧《冼星海》中饰演钱韵玲。
2006年6月,在北京电影学院大力支持的人物传记电影《丛飞》中饰演丛飞的妻子邢丹。
2007年,领衔主演以真实史料为背景的抗日间谍剧《五号特工组》,饰演原国民政府国防部中校参谋、中共地下党员欧阳剑平。同年主演高翊浚执导的情感伦理剧《因爱之名》。
2008年,与许亚军领衔主演导演安战军继《一年又一年》后执导的又一部生活剧《原谅》。随后与王亚楠主演爱情偶像剧《结婚吧我会更爱你》饰陈歌。
2009年,搭档斯琴高娃、宋春丽主演年代情感题材剧《娘》。同年出演纪念汶川地震三周年的电影《72小时》中肖涵若一角。在安战军执导的电影《万家灯火》中饰演二媳妇。8月因在电影《沂蒙六姐妹》中饰演王坪,被授予沂蒙荣誉市民称号。
2010年,与马跃领衔主演电影《公道天职》。同年参演革命历史儿童题材剧《小小飞虎队》。
2011年,参演连奕名自导自演的军医题材剧《五湖四海》饰朱秀娥。同年在原班人马打造的电视剧《五号特工组2》中再次饰演欧阳剑平一角。
2012年,出演郭涛、梅婷领衔主演的情感剧《父母爱情》,并因扮演的虽没文化但是善良任劳任怨的农村妇女江德花一角入围第27届中国电视金鹰奖众喜爱的电视剧演员奖。
2014年,出演传记题材电影《启功》,在片中饰演启功青年时代的妻子章宝琛,是个端庄贤惠,勤俭持家的好妻子。
2015年3月,出演的改编自台湾同名影片的亲情励志年代剧《搭错车》杀青。随后主演电影《亲娘》。
2015年6月,主演刘飚执导的年代大戏《金水桥边》,与梁冠华合作饰演其夫人关白氏;10月,客串都市女性时尚题材电视剧《欢乐颂》,饰演养老院院长秀媛一角。11月参演亲情大戏《亲娘木兰》。
2017年8月,在管虎、费振翔指导的当代都市剧《大叔与少年》中饰演温婉恬静的单亲妈妈赵荔,也是一位独具匠心的字画修复师。
2018年,参演的电视剧《西柏坡的回声》在中国大陆播出。12月25日,参演的电视剧《知知否知否应是绿肥红瘦》在湖南卫视播出,在剧中饰演王若弗。
2019年2月9日,参加综艺节目《快乐大本营》。5月10日,参加综艺节目《难得的假期》。5月23日,凭借电视剧《知否知否应是绿肥红瘦》获第25届上海电视节白玉兰奖最佳女配角奖提名。6月,参演的电影《一切如你》在上海电影节期间组织放映活动。8月13日,参演的青春运动题材电视剧《极限17:羽你同行》在芒果TV播出,在剧中饰演李芳。9月12日,参演的电影《一切如你》在中国大陆上映。
2020年1月11日,参加的原创声音魅力竞演秀《声临其境》第三季第三期在湖南卫视播出。1月24日,参加2020年中央电视台春节联欢晚会,表演小品《父母爱情》。2月9日,参演的电视剧《上古密约》在中国大陆播出。4月11日,获得原创声音魅力竞演秀《声临其境第三季》冠军。6月5日,参演的电视剧《你是我的命中注定》定档在腾讯视频播出,在剧中饰演林西施。6月16日,主演的电视剧《隐秘的角落》定档在爱奇艺播出,在剧中饰演周春红。8月2日,参加的综艺节目《天天向上》定档在湖南卫视播出。9月15日,获第七届中国电视好演员网剧组女演员提名。9月29日,参演的电视剧《在一起》定档在东方卫视、腾讯视频、爱奇艺和优酷播出,在剧中饰演陈静。11月16日,参演的电视剧《最好的时代》定档在湖南卫视播出,在剧中饰演田馨。11月17日,主演的电影《同学们好》开机。12月28日,凭借《隐秘的角落》获第29届华鼎奖中国百强电视剧最佳女配角奖。
2021年2月1日,主演的电视剧《觉醒年代》定档在央视一套播出,在剧中饰演赵纫兰。2月20日,参加的综艺节目《见字如面第五季》定档在黑龙江卫视首播。同年,参加综艺节目《鲁豫有约一日行8》。5月1日,参演的电影《扫黑·决战》定档在中国内地上映,在剧中饰演齐妻。5月21日,凭借电视剧《觉醒年代》获得第27届上海电视节白玉兰奖最佳女配角提名。7月9日,参演的电影《中国医生》定档在中国内地上映。8月17日,参演的电视剧《乔家的儿女》定档在浙江卫视、江苏卫视、腾讯视频播出,在剧中饰演魏淑芳。9月19日,参与配音的纪录片《第一餐》定档在哔哩哔哩播出。12月2日,凭借《觉醒年代》获第32届华鼎奖中国近现代题材电视剧最佳女演员提名。12月5日,参演的电视剧《谁是凶手》定档在爱奇艺播出,在剧中饰演曹瑛侠。
2022年4月1日,参演的电视剧《原来是老师啊!》定档在爱奇艺播出,在剧中饰演苏母。4月10日,参演的电视剧《亲爱的小孩》定档在CCTV-8、爱奇艺、随刻、奇异果TV播出,在剧中饰演瑨姐。6月2日,主演的电影《暗恋·橘生淮南》定档在中国内地上映,在片中饰演洛母。同年,主演电视剧《兰闺喜事》,在剧中饰演杜如玉。7月22日,主演的电视剧《天才基本法》定档在爱奇艺播出,在剧中饰演罗静。8月13日,参演的电影《断·桥》定档在中国内地上映。同年,主演电视剧《父辈的荣耀》,在剧中饰演存花。11月5日,参演的电视剧《大博弈》定档在东方卫视、浙江卫视、腾讯视频播出。11月14日,参演的电视剧《爱的二八定律》定档在腾讯视频播出,在剧中饰演唐伊慧。
2023年3月18日,参演的电视剧《春色寄情人》开机,在剧中饰演廖涛。4月15日,主演的电视剧《龙城》定档在CCTV-8、爱奇艺播出,在剧中饰演三婶。4月22日,参演的电视剧《漫长的季节》定档在腾讯视频播出。5月7日,主演的电视剧《外婆的新世界》定档在爱奇艺播出,在剧中饰演田淑芳。
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