何琳出生于上海,因参加过多部电视剧的演出而成为小童星。
小学在大兴安岭深处的学校里读了五年书,初中毕业后就读上海儿童艺术剧院,与陆毅是同班同学。
1996年9月,何琳顺利考入北京电影学院表演系,与陈坤、赵薇、黄晓明、郭晓冬、颜丹晨、张恒等是同班同学。
1998年,何琳的父亲患肝硬化去世。
1990年,13岁的何琳出演第一部电影《禁烟枪手》,在剧中饰演小兰。
1996年,参演张弘执导的儿童电影《贝加的樱桃班》,在剧中饰白老师。
1997年秋,上大二的何琳首次出演电视剧,在杨阳执导的《牵手》中饰演敢爱敢恨的女主角夏小冰,获第17届中国电视金鹰奖优秀女配角奖。
1998年,何琳出演由安战军执导的《一年又一年》女主角陈晓欧。
2000年大学毕业后,何琳签约北京君为文化传播公司,正式开始职业演艺事业。同年出演《欲望》《白色陷阱》《玲珑女》《莲花太子》 四部电视剧,并与林鹏主演电影《路缘情归》。
2005年,28岁的何琳出演电视电影《为奴隶的母亲》,获第33届国际艾美奖最佳女主角奖,是亚洲女星第一次获得这个享有电视奥斯卡称誉的奖项 。同年主演《梦回清河》《美丽的谎言》《十月怀胎》等连续剧。
2006年,在电视剧《麻辣婆媳》中饰演吴芮,获第26届中国电视剧飞天奖优秀女演员提名;
2008年,在新版电视剧《再向虎山行》中出演经典年代美女李梦颖 ;同年在张柏芝主演的电视剧《天涯歌女》中饰演赵花 。
2009年,在《建国大业》中客串解放军女兵;同年,主演电视剧《女人无悔》,饰演孤儿石惠。7月,出演都市情感剧《一一之吻》。
2010年,主演反映河源客家文化的电影《阿妹》;同年,在电视剧《不能没有娘》中出演善良的渔村女教师“海娘”;12月1日,参演的年代剧《金婚风雨情》播出,在剧中饰演秀清。
2011年,参加东方卫视《舞林大会》第二期,表演节目“黑天鹅”。同年,参演大型纪实性主旋律革命史诗大片《国家命运》,在剧中饰演钱学森的夫人蒋英。同年,在电视剧《家常菜》中饰演杨麦香 。主演抗日题材的电视连续剧《激战江南》 。
2012年9月10日,与果静林主演以为“两弹一星”研制做出巨大牺牲的无名英雄为原型的电视剧《青海花儿》,在剧中饰演林文馨。
2013年,出演电视剧《影子在行动》。同年,在第三届时尚大典“蝶舞新翩”2013 时尚影响力大典中获封年度杰出女演员 ;同年4月,何琳参与录制了CCTV2两期《购时尚》五一特别节目;在当代都市家庭喜剧《那金花和她的女婿》中,饰演男主角何兆海后来的女朋友丁心茹。
2014年8月8日出演的历史传记题材剧《历史转折中的邓小平》在央视一套黄金档播出,何琳在剧中饰演邓小平同志的三女邓榕。
2014年3月27日,何琳受邀出席第八届亚洲电影大奖并担任颁奖嘉宾。
2016年5月,做客《崔神驾到》;9月30日,参演的电视剧《暗战双凤楼》在开播,在剧中饰演季素。
2017年,参演由欢瑞世纪出品,新媒诚品、新文化联合出品,尹涛、刘国辉执导的青春神话剧《天乩之白蛇传说》;11月20日,参演的电影《邹碧华》上映,在片中饰演陈阳。
2019年9月30日,参演的电影《攀登者》上映,在剧中饰演赵虹。
2020年12月11日,参演的电视剧《千金归来》在优酷视频播出,在剧中饰演沈逸茹;12月15日,参演的电视剧《可怜天下男人心》在爱奇艺播出。
2021年2月26日,主演的电影《智爱2026》定档在中国内地上映,在剧中饰演冯芳;7月1日,参演的电影《1921》上映;10月21日,参演的电视剧《突围》定档在东方卫视、浙江卫视、腾讯、爱奇艺、优酷播出,在剧中饰演童格华。
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