1978年,施大生考入河北省艺术学校话剧班,并学习了三年的话剧表演。1981年,施大生从河北省艺术学校毕业,并被分配到河北省承德话剧团工作。1986年,施大生考入上海戏剧学院表演系。大学毕业后,他被分配到上海人民艺术剧院工作;期间,他还出演了《魂系何方》、《昨日的桂园树》等话剧。
1995年,施大生成为上海话剧艺术中心的一名话剧演员,从而正式进入演艺圈;同年,与何音合作主演年代情感剧《梦幻天使》,在剧中饰演年轻有为的男主角辛子安。
1998年,出演江澄执导的犯罪悬疑剧《生死之门》,在剧中饰演有勇有谋的男主角程远飞。
2000年,与陈建斌、苗圃、吴越合作主演医疗情感剧《关怀》,在剧中饰演医生刘凯。
2002年,与汪国辉、李威、江淮合作主演都市情感励志剧《追梦谷》,在剧中饰演原是职业球手的大德企业总裁许志强。
2003年,与苏有朋、蔡琳、何润东合作主演青春爱情偶像剧《情定爱琴海》,在剧中饰演郑慧玟的丈夫陆良平,与陈姿颖饰演一对夫妻。
2005年,出演王强执导的家庭情感剧《当婚姻走到尽头》,在剧中饰演未达目的不择手段的陆君;同年,出演马功伟执导的军旅剧《我在天堂等你》。
2006年,出演郦红执导的都市情感剧《女人,女人》,在剧中饰演土地局局长周尚飞;同年,出演王志文、左小青、曾红生主演的商战剧《天道》。
2008年,出演江珊、李颖、刘佳主演的家庭伦理剧《一颗颗眼泪都是爱》,在剧中饰演要强、奋进且责任感很强的杨明亮。
2009年,出演陈朱煌执导的家庭伦理剧《娘妻》,在剧中饰演孙雅婷的父亲孙大鹏,与佟丽娅饰演一对父女。
2010年,出演雷国华执导的话剧《蜗居》,在剧中饰演男主角宋思明;随后,出演白秋林执导的年代剧《乐缘堂风云》,在剧中饰演土匪宋大哥;同年,与王姬、宋佳、马精武合作主演古装情感剧《西厢记》,在剧中饰演女主角崔莺莺的父亲崔相国;之后,出演阎建钢执导的抗战剧《中国地》,在剧中饰演性格耿直、刚正不阿的县长马应民。
2011年,与李小冉、朴海镇、邵兵合作主演都市情感剧《钱多多嫁人记》,在剧中饰演男主角许飞的父亲许鹏,与朴海镇饰演一对父子;同年,出演杜军执导的家庭伦理剧《毕有财》,在剧中饰演男主角毕有财的发小郑天顺。
2012年,出演吴秀波、海清、张嘉译主演的医疗剧《心术》,在剧中饰演松山医院主任吴文清;随后,出演张钧甯、刘美含、朱梓骁主演的都市偶像剧《童话二分之一》,在剧中饰演京麒、京伟的父亲京庆宇;同年,出演王珞丹、崔始源、袁弘主演的都市爱情励志剧《转身说爱你》,在剧中饰演日升集团董事长于日升。
2013年,出演黄宗泽、戚薇、马天宇主演的古装推理悬疑剧《少年神探狄仁杰》,在剧中饰演位高权重、老谋深算且工于心计的刑部尚书王佑仁。
2014年,出演胡军、左小青,赵立新主演的谍战剧《于无声处》,在剧中饰演202厂三车间副主任韩伟光。
2016年,出演李路执导的当代检察反腐剧《人民的名义》,在剧中饰演大陆集团董事长王大路。
2018年3月12日,参演的电视剧《梦想合伙人》播出。7月1日,参演的电视剧《诚忠堂》在央视八套播出。
2019年5月7日,参演的电视剧《破冰行动》在爱奇艺播出,在剧中饰演苏建国。12月,参演电视剧《大中医》。
2020年12月26日,参演的电视剧《阳光之下》定档在芒果TV播出,在剧中饰演刘局长。
2021年4月28日,参演的电视剧《脑海深处》定档在爱奇艺播出。10月29日,参演的电影《青春作伴好还乡》定档在中国内地上映。
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